https://www.cellsignal.com/applications/signalstar-multiplex-ihc?_requestid=1680310
최근 출시된 Spatial biology 연구를 위한 CST의 새로운 tool, CST SignalStar™ Multiplex IHC 안내 공지 입니다.
(CST SignalStar™ Multiplex IHC 관련 제품 주문은 일반 catalog 제품의 주문 방식과 다르므로 반드시 공지 메일을 끝까지 확인하시기 바랍니다.)
CST의 SignalStar™ Multiplex IHC는 Spatial Biology 연구를 위한 혁신적인 도구로, 고품질의 제품 및 검증된 항체 및 oligo 패널과 프로토콜을 제공합니다. SignalStar™ 기술은 높은 sensitivity와 specificity로 formalin-fixed, paraffin-embedded (FFPE) 조직 샘플에서 여러 바이오마커 signal을 동시에 증폭합니다. 단 2일 만에 최대 8개의 target에 대한 정확하고 신뢰할 수 있는 IHC 데이터를 생성할 수 있습니다(기존 프로토콜 대비 70% 시간 절약 가능).
1. CST SignalStar™ Multiplex IHC 원리
SignalStar™ IHC 분석을 사용하면 FFPE 조직에서 최대 8개의 target을 동시에 검출할 수 있습니다. Deparaffinized 및 rehydrated FFPE 조직 절편은 antigen retrieval (A)를 거치며, 선택한 plex size의 모든 antibody (최대 3~8개의 고유한 oligo-conjugated antibodies)가 첫 incubation step (B)에 추가됩니다. Fluorescent dyes (채널: 488, 594, 647, 750nm)가 결합된 complementary oligonucleotides는 antibodies와 결합하여 첫 번째 round (imaging round 1)에서 최대 4개의 oligo-conjugated antibodies의 신호를 증폭합니다(C-D). Plex size가 4개보다 큰 경우, imaging round 1의 oligonucleotides 와 fluorophores가 dsDNase에 의해 제거되고(E), 두 번째 round (imaging round 2)가 추가되어 최대 4개의 추가 oligo-conjugated antibodies (F)의 신호를 증폭합니다. 그런 다음 두 이미지는 소프트웨어를 사용하여 최대 8plex의 이미지(G)를 생성할 수 있습니다.
2. CST SignalStar™ Multiplex IHC 제품
SignalStar™ Multiplex IHC 실험을 위해서는 아래와 같은 제품이 필요합니다.
l SignalStar™ IHC Buffer Kit
| Cat.# | SignalStar™ IHC Buffer Kit Name | Description |
| 29414 | SignalStar™ Midplex IHC Buffer Kit | 5-8개 target에 대한 signal 관찰 시(Imaging Round 1, 2에 해당) |
| 63043 | SignalStar™ Miniplex IHC Buffer Kit | 3-4개 target에 대한 signal 관찰 시(Imaging Round 1에 해당) |
l SignalStar™ Oligo-Antibody Pair (C)
- SignalStar™ oligo-conjugated antibodies (A) + SignalStar™ complementary oligos (B)
2023년 10월 기준, 29개의 human target에 대한 SignalStar™ oligo-conjugated antibody 29개가 있으며, 지속적인 업데이트와 함께 mouse target도 추가될 예정입니다.
| Antibodies | Clone | Antibodies | Clone | Antibodies | Clone |
| CD11b/ITGAM | D6X1N | CD68 | D4B9C | PD-L1 | E1L3N® |
| CD11c | D3V1E | CD86 | E2G8P | Pan-Keratin | C11 |
| CD16 | D1N9L | CD8α | D8A8Y | Phospho-Stat3 (Tyr705) | D3A7 |
| CD163 | D6U1J | Granzyme B | D6E9W | SIRPα/SHPS1 | D6I3M |
| CD20 | E7B7T | HLA-DRA | E9R2Q | TCF1/TCF7 | C63D9 |
| CD206/MRC1 | E2L9N | ICOS | D1K2T™ | TIM-3 | D5D5R™ |
| CD31 (PECAM-1) | 89C2 | Ki-67 | 8D5 | Tox/Tox2 | E6I3Q |
| CD3ε | D7A6E™ | LAG3 | D2G4O | Vimentin | D21H3 |
| CD44 | E7K2Y | NT5E/CD73 | D7F9A | α-Smooth Muscle Actin | D4K9N |
| CD45 (Intracellular Domain) | D9M8I | PD-1 (Intracellular Domain) | D4W2J |
* 주의사항 *
- 반드시 CST에서 제공하는 SignalStar™ 프로토콜대로 실험해야 합니다.
- 고객의 형광현미경 장비에 반드시 아래 이미지와 같은 Laser lines and/or filter sets가 준비되어 있어야 합니다.
CST SignalStar™ Multiplex IHC 관련 제품 모두 customized product의 성격을 가지며, 따라서 일반 catalog 제품과 같이 CST 홈페이지에서 검색은 되지만 kit와 Oligo-Antibody Pair 제품 각각 주문은 불가능합니다. 주문을 위해서는, 고객이 CST 홈페이지에서 “SignalStar™ Multiplex IHC Panel Builder”라는 프로그램을 통해 고객이 원하는 target과 그에 대한 Fluorescent dyes 채널(488, 594, 647, 750nm)을 선택해야 합니다(아래 이미지, 붉은 박스 참조). SignalStar™ Multiplex IHC Panel Builder를 통해 고객의 실험 설계가 완료되면 각각의 target에 대한 고객 맞춤형 SignalStar™ oligo-antibody pair와 고객이 선택한 target plex수에 따라 Midplex 또는 Miniplex IHC Buffer Kit이 제공됩니다.
[Cell Signaling Technology] SignalStar™ Multiplex IHC for Spatial Biology – Results up to 70% Faster
l CST SignalStar™ Multiplex IHC Resource Center 링크